高效液相色譜儀性能確認(rèn)

高效液相色譜儀（HPLC）的性能確認(rèn)是保證儀器能夠滿足分析要求的重要步驟。所謂性能確認(rèn)，指的是對(duì)HPLC系統(tǒng)的各項(xiàng)關(guān)鍵性能進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)估，確保儀器狀態(tài)和功能符合法規(guī)或方法標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)要求。這一環(huán)節(jié)是分析實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系（如GLP/GMP、ISO/IEC 17025等）的必要內(nèi)容，也稱為“系統(tǒng)適用性確認(rèn)”或“儀器合格性確認(rèn)”（PQ/Performance Qualification）。

下面系統(tǒng)介紹高效液相色譜儀的性能確認(rèn)內(nèi)容和流程。

一、確認(rèn)范圍

主要包括：輸液系統(tǒng)（泵）、進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理等模塊的關(guān)鍵參數(shù)。

二、性能確認(rèn)的常見項(xiàng)目與方法

1. 流量準(zhǔn)確性（泵）

內(nèi)容：設(shè)定流速后，以量筒收集出液體積并測(cè)時(shí)，計(jì)算實(shí)際流速。

標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)測(cè)流速與設(shè)定流速的相對(duì)偏差一般應(yīng)≤2%。

方法：如設(shè)1.00 mL/min，連續(xù)收集10 min，應(yīng)收1.00×10=10 mL，稱重或量取。

2. 流量穩(wěn)定性（泵脈沖性）

內(nèi)容：同一條件下多次收集同一時(shí)間內(nèi)的流出液體積，或觀察總離差。

標(biāo)準(zhǔn)：通常RSD≤1%（具體按廠家或法規(guī)）。

3. 進(jìn)樣重復(fù)性（自動(dòng)/手動(dòng)進(jìn)樣）

內(nèi)容：用同一標(biāo)準(zhǔn)溶液分析多次進(jìn)樣，考察峰面積或峰高的RSD。

標(biāo)準(zhǔn)：一般RSD≤1%（≤2%視檢測(cè)條件及法規(guī)）。

4. 檢測(cè)器噪音與漂移

內(nèi)容：

噪音：基線的短時(shí)波動(dòng)大小（列如5min內(nèi)峰—谷差）。

漂移：基線的長期慢漂移幅度。

標(biāo)準(zhǔn)：按廠家說明書或方法標(biāo)準(zhǔn)（如UV檢測(cè)噪音<20μAU，漂移<100μAU/h）。

方法：裝純?nèi)軇O(shè)定參數(shù)，空運(yùn)行，測(cè)量基線波動(dòng)。

5. 檢測(cè)器線性范圍與相關(guān)性

內(nèi)容：用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，繪制校準(zhǔn)曲線，計(jì)算相關(guān)系數(shù)R2。

標(biāo)準(zhǔn)：R2≥0.99，滿量程無明顯響應(yīng)飽和。

6. 保留時(shí)間重復(fù)性（恒流速下、同一柱）

內(nèi)容：測(cè)定相同組分多次色譜的保留時(shí)間RSD。

標(biāo)準(zhǔn)：RSD通常≤1%或更小。

7. 柱溫箱控溫性能

內(nèi)容：設(shè)置某一溫度，檢測(cè)實(shí)際溫度（內(nèi)置傳感器或溫度計(jì)）。

標(biāo)準(zhǔn)：與設(shè)定值偏差≤±1℃，一般±0.5℃。

8. 死體積/保留體積測(cè)試

內(nèi)容：用不可保留物質(zhì)（如尿素、甲酸鈉等）測(cè)柱死體積。

標(biāo)準(zhǔn)：資料對(duì)比，無異常，結(jié)構(gòu)吻合。

9. 其它確認(rèn)項(xiàng)（視儀器及方法）

檢測(cè)器波長準(zhǔn)確性（UV-Vis用校準(zhǔn)濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液），如鉻酸鹽等。

自動(dòng)進(jìn)樣器定位準(zhǔn)確性。

混合器或梯度比例準(zhǔn)確性等。

三、確認(rèn)流程和注意事項(xiàng)

建立確認(rèn)方案（含參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)、方法、頻次）。

使用校準(zhǔn)過的量具、標(biāo)準(zhǔn)品和工具。

逐項(xiàng)測(cè)試并記錄原始數(shù)據(jù)。

和技術(shù)參數(shù)、法規(guī)或方法要求比對(duì)，判定是否合格。

確認(rèn)單據(jù)需雙人校核、簽字，確保數(shù)據(jù)可靠性。

確認(rèn)周期：多數(shù)實(shí)驗(yàn)室建議新購機(jī)初次確認(rèn)，每年/每半年周期性確認(rèn)，或維修后、搬運(yùn)后重新確認(rèn)。